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一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用
- 专利权人:
- 江南大学
- 发明人:
- 饶志明,田灵芝
- 申请号：
- CN201110289796.3
- 公开号：
- CN102367432B
- 申请日:
- 2011.09.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 摘要：
- 一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用，属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化L-谷氨酸产GABA上的应用。首先，PCR扩增获得植物乳杆菌GB 01-21谷氨酸脱羧酶(GAD)基因，构建了重组质粒pET-28a-lpgad，并在E.coli BL21(DE3)成功表达，其次，粗酶液采用Ni柱亲和层析纯化获得重组GAD，并对其酶学性质进行初步研究，用于指导转化条件的优化。最终5L发酵罐上进行转化实验，GABA累积浓度可达204.5g/L，摩尔转化率为97.92％，为进一步工业化应用打下了良好的基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
