It is a technical object of the present invention to simplify the technique of obtaining insulin producing cells to obtain at least 70% of functionally active insulin producing cells in differentiated cell culture. The method includes obtaining epithelial progenitor cells and then differentiating the resulting cells into pancreatic cells capable of secreting glucose-sensitive insulin, wherein the pancreatic differentiation is at least within two steps, namely (a) within 4 to 15 days. A first step of differentiating cells in a culture medium containing serum, glutamine, epidermal growth factor, transferrin, sodium selenite, retinoic acid, isoproterenol of a mammal； And (b) a second step of differentiating the cells in a culture medium containing at least mammalian serum, glutamine, epidermal growth factor, retinoic acid, nicotinamide, hepatocyte growth factor, dexamethasone within 4 to 15 days； Incubation in these two steps is carried out at 37 ° C. in a 5% CO 2 gas atmosphere. The group includes methods for differentiating mammalian insulin producing cells and pancreatic epithelial progenitor cells of mammals, including humans, as well as methods for replacement therapy of diabetes mellitus using cell products.본 발명의 기술적 목적은 인슐린 생산 세포 수득 기술을 간편화하여, 분화된 세포 배양액 중 기능상 활성인 인슐린 생산 세포를 적어도 70% 수득하는 것이다. 본 방법은 상피 전구 세포를 수득한 다음, 이로써 얻어진 세포를 글루코스 감수성 인슐린 분비가 가능한 췌장 세포로 분화시키는 단계를 포함하는데, 이때의 췌장 분화는 2 단계, 즉 (a) 4일 내지 15일 이내에 적어도 포유동물의 혈청, 글루타민, 표피 성장 인자, 트랜스페린, 아셀렌산나트륨, 레티노산, 이소프로테레놀을 함유하는 배양 배지 중에서 세포를 분화시키는 제1 단계； 및 (b) 4일 내지 15일 이내에 적어도 포유동물의 혈청, 글루타민, 표피 성장 인자, 레티노산, 니코틴아미드, 간세포 성장 인자, 덱사메타손을 함유하는 배양 배지 중에서 세포를 분화시키는 제2 단계로 진행되고； 상기 두 단계에서의 배양은 5% CO2 가스 대기 중에 37℃에서 진행된다. 본 발명군은 포유동물의 인슐린 생산 세포와, 인간을 포함하는 포유동물의 췌장 상피 전구 세포의 분화 방법뿐만 아니라, 세포 생성물을 사용하는 진성 당뇨병의 대체 요법을 위한 방법을 포함한다.
