THE UNITED STATES OF AMERICA; AS REPRESENTED BY THE SECRETARY OF AGRICULTURE
发明人:
HAMMOND, John,LIM, Hyoun-Sub,DOMIER, Leslie, L.
申请号：
USUS2010/056953
公开号：
WO2011/087562A3
申请日:
2010.11.17
申请国别(地区):
WO
年份:
2012
代理人:
摘要：
We have developed a versatile plant viral vector system based on Alternanthera mosaic virus (AItMV), suitable for infection by agroinfiltration or in vivo T7 transcripts from the same clone agroinfection is enhanced by coinfiltration of a T7 RNA polymerase construct. Variants adapted for efficient protein expression, or for virus-induced gene silencing (VIGS), are based on a specific amino acid substitution (L88P) in the triple gene block 1 (TGB l) protein affecting RNA silencing suppression. A bipartite delivery system developed for AItMV delivers replicase (RdRp) functions separately from movement and encapsidation (TGB and coat protein, CP) functions by agroinfiltration, resulting in precise recombination of RdRp and TGB-CP constructs in planta. The bipartite delivery system has potential for high throughput protein expression or VIGS with the appropriate TGBl variant, for hosts including Nicotiana benthamiana and Arabidopsis thaliana. Equivalent TGB l substitutions in other potexviruses also reduced RNA silencing suppression, demonstrated with Potato virus X.La présente invention concerne un système de vecteur viral de plante polyvalent basé sur le virus de la mosaïque dAlternanthera (AItMV), adapté pour linfection par agro-infiltration ou des produits de transcription T7 in vivo du même clone lagro-infection est augmentée par co-infiltration dune construction dARN polymérase T7. Des variants adaptés pour lexpression efficace de protéine, ou pour un silençage génique induit par un virus (VIGS), sont basés sur une substitution spécifique dacide aminé (L88P) dans la protéine de bloc génique triple 1 (TGB 1) affectant la suppression de silençage par ARN. Un système de délivrance bipartite développé pour AItMV transfère des fonctions de réplicase (RdRp) séparément des fonctions de mouvement et dencapsidation (TGB et protéine denveloppe, CP) par agro-infiltration, conduisant à une recombinaison précise de constructions RdRp et TGB-CP in planta. Le système de délivra
