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从富含多糖多酚及次生代谢物质的植物组织中提取总RNA的方法
- 专利权人:
- 昆明理工大学
- 发明人:
- 刘迪秋,王继磊,李文娴,葛锋,陈朝银,田荣欢
- 申请号:
- CN200910094704.9
- 公开号:
- CN101638651A
- 申请日:
- 2009.07.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2010
- 代理人:
- 金耀生
- 摘要:
- 本发明是一种利用异硫氰酸胍-氯仿抽提、Tris饱和酚纯化植物RNA的抽提方法。本发明改良了传统的异硫氰酸胍法,采用裂解后氯仿抽提加酚纯化两步法,分别从红皮梨的叶片和果皮、葡萄的叶片和果肉、果皮组织以及草莓果实和新疆紫草愈伤组织中提取到了高质量的总RNA。该方法的抽提缓冲液中含有异硫氰酸胍、十二烷基肌氨酸钠、柠檬酸钠、可溶性聚乙烯吡咯烷酮和β-巯基乙醇,既能高效裂解植物细胞释放RNA,有效抑制RNA酶的活性,还能防止酚类物质的氧化和排除次生代谢物质的干扰。第二步用Tris饱和酚纯化粗提RNA溶液,能除去与RNA共沉淀的多糖和蛋白质。本发明操作步骤简单、经济实惠、稳定性好,适用于从富含多糖多酚及次生代谢物质的植物组织中提取高质量总RNA。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/