A method for producing P 1 ,P 4 -di(uridine 5'-)tetraphosphate (UP 4 U) that can avoid reduction of the synthetic efficiency without using UTP free is developed. A method for producing UP 4 U comprising reacting a phosphoric acid-activating compound represented by formula [II] or [III] with a phosphoric acid compound selected from the group consisting of UMP, UDP, UTP and a pyrophosphoric acid or a salt thereof (excluding UTP free) in water or a hydrophilic organic solvent, in the presence of a metal ion selected from the group consisting of an iron (II) ion, an iron (III) ion, a trivalent aluminum ion, a trivalent lanthanum ion, and a trivalent cerium ion. where, in the formula [II], R 1 represents a uridyl group binding to the 5'-position, X represents a heterocyclic group, and n represents an integer of 1 or 2, where, in the formula [III], X represents a heterocyclic group selected from the group consisting of an imidazolyl group, a benzimidazolyl group, and a 1,2,4-triazolyl group.UTP 프리를 사용하지 않고, 합성 효율의 저하를 피할 수가 있는 P1,P4-디(우리딘 5'-)테트라포스페이트(UP4U)의 제조법을 개발한다.식[II] 또는[III]으로 표시되는 인산 활성화합물과 UMP, UDP, UTP 및 피로인산으로 이루어진 군으로부터 선택되는 인산 화합물 또는 그의 염(UTP 프리를 제외하다)을, 철(II)이온, 철(III)이온, 3가 알루미늄이온, 3가 란탄이온 및 3가 세륨이온으로 이루어진 군으로부터 선택되는 금속 이온의 존재하, 물 또는 친수성 유기용매 중에서 반응시키는 것을 특징으로 하는 UP4U의 제조법.(식[II]중, R1는 5'위로 결합한 우리딜기를, X는 복소환식기를, n는 1 또는 2의 정수를 나타낸다.)(식[III]중, X는 이미다졸릴기, 벤즈이미다졸릴기 및 1,2,4-트리아졸릴기로 이루어진 군으로부터 선택되는 1개의 복소환식기를 나타낸다. )