A method for producing P1, P4-di (uridine 5 ′-) tetraphosphate (UP4U) that can avoid the decrease in synthesis efficiency without using UTP-free is developed. A phosphate active compound represented by the formula [II] or [III] and a phosphate compound selected from the group consisting of UMP, UDP, UTP and pyrophosphate, or a salt thereof (excluding UTP-free) is converted to iron (II ) Ion, iron (III) ion, trivalent aluminum ion, trivalent lanthanum ion, and trivalent cerium ion, in the presence of a metal ion selected from the group consisting of water and a hydrophilic organic solvent. The manufacturing method of UP4U. (R1, X, n in the formula [II] and X in the formula [III] each represent the meaning described in claim 1.)ＵＴＰフリーを使用せず、合成効率の低下を避けることができるＰ１，Ｐ４－ジ（ウリジン５‘－）テトラホスフェート（ＵＰ４Ｕ）の製造法を開発する。 式［ＩＩ］または［ＩＩＩ］で示されるリン酸活性化合物と、ＵＭＰ、ＵＤＰ、ＵＴＰおよびピロリン酸から成る群より選択されるリン酸化合物またはその塩（ＵＴＰフリーを除く）とを、鉄（ＩＩ）イオン、鉄（ＩＩＩ）イオン、３価アルミニウムイオン、３価ランタンイオンおよび３価セリウムイオンからなる群より選択される金属イオンの存在下、水または親水性有機溶媒中で反応させることを特徴とする、ＵＰ４Ｕの製造法。（式［ＩＩ］中の、Ｒ１、Ｘ、ｎ、式［ＩＩＩ］中のＸは、各々、請求項１に記載の意味を表す。）
