Provided are a CRISPR-Cas9 system, and preparation method and use thereof. The system comprises sgRNAs at specific gene loci on a specific target HIV genome, and the specific gene loci on the HIV genome comprise one or more of Gag, Env, Pol, Tat, Nef, Vif, Vpr, Vpu, 5LTR, 3LTR and Rev.Linvention concerne un système CRISPR-Cas9, ainsi que son procédé de préparation et dutilisation. Le système comprend des ARNsg au niveau de loci de gènes spécifiques sur un génome du VIH cible spécifique, et les loci de gènes spécifiques sur le génome du VIH comprennent un ou plusieurs éléments sélectinnés parmi Gag, Env, Pol, Tat, Nef, Vif, Vpr, Vpu, 5LTR, 3LTR et Rev.