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DETECTION OF MICRO-ORGANISMS BASED ON THEIR NAD-DEPENDENT DNA LIGASE ACTIVITY
专利权人:
发明人:
申请号:
EP08775898.3
公开号:
EP2179052B1
申请日:
2008.07.09
申请国别(地区):
EP
年份:
2012
代理人:
摘要:
NAD-dependent ligase is identified as an indicator of micro¬ organisms in a sample. A method of detecting the presence of an NAD-dependent ligase expressing micro-organism in a sample comprises the steps of: (a) contacting the sample with a nucleic acid molecule which acts as a substrate for NAD-dependent ligase activity in the sample, (b) incubating the thus contacted sample under conditions suitable for NAD-dependent ligase activity and (c) specifically determining the presence of a ligated nucleic acid molecule resulting from the action of the NAD- dependent ligase on the substrate nucleic acid molecule to indicate the presence of the NAD-dependent ligase expressing micro-organism. The method has a number of applications and kits for carrying out the methods are also provided. Lysostaphin preparations substantially free from nuclease and/or ligase contaminants are produced by heating a lysostaphin preparation which contains nuclease and/or ligase contaminants under conditions whereby nuclease and/or ligase activity is reduced whereas endopeptidase activity of the lysostaphin is substantially unaffected.La présente invention concerne une ligase NAD-dépendante identifiée en tant quindicateur de micro-organismes dans un échantillon. Un procédé permettant de détecter la présence dans un échantillon dune ligase NAD-dépendante exprimant un micro-organisme comprend les étapes consistant à : (a) mettre en contact léchantillon avec une molécule dacide nucléique qui agit tel un substrat pour lactivité de la ligase NAD-dépendante dans léchantillon (b) incuber léchantillon mis en contact dans des conditions propices à lactivité de la ligase NAD-dépendante et (c) déterminer spécifiquement la présence dune molécule dacide nucléique ligaturée à la suite de laction de la ligase NAD-dépendante sur la molécule dacide nucléique servant de substrat afin dindiquer la présence de la ligase NAD-dépendante exprimant un micro-organisme. Le procédé présente différentes applications et lin
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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