A method of preparing a conditionally active polypeptide from a parent polypeptide, comprising steps of evolving a DNA encoding the parent polypeptide by increasing a net charge of the parent polypeptide using one or more techniques selected from increasing a total number of codons of charged amino acid residues in the DNA and decreasing a total number of codons of uncharged amino acid residues in the DNA to create mutant DNAs； expressing the mutant DNAs to obtain mutant polypeptides； and selecting the conditionally active polypeptide from the mutant polypeptides which exhibits a decrease in activity in a first assay at a first value of a condition compared to the same activity in a second assay at a second value of the same condition. The conditionally active polypeptide, pharmaceutical compositions containing same, nanoparticle and drug conjugates thereof and uses thereof are also provided.Un metodo para preparar un polipeptido condicionalmente activo a partir de un polipéptido parental, que comprende los pasos de evolucionar un ADN que codifica el polipeptido parental aumentando una carga neta del polipeptido parental usando una o mas tecnicas seleccionadas del aumento de un numero total de codones de residuos de aminoacidos cargados en el ADN y disminución de un numero total de codones de residuos de aminoacidos no cargados en el ADN para crear ADN mutantes； expresando los ADN mutantes para obtener polipeptidos mutantes； y seleccionarel polipeptido condicionalmente activo de los polipepotidos mutantes que presentan una disminucion en la actividad en un primer ensayo en un primer valor de una condicion comparada con la misma actividad en un segundo ensayo en un segundo valor de la misma condicion. Tambien se proporciona el polipeptido condicionalmente activo, composiciones farmaceuticas que contienen el mismo, nanoparticulas y conjugados de farmaco de los mismos y usos de los mismos.
