一种用于检测小麦条锈菌细胞周期依赖性蛋白激酶2基因（Cdc2）SNP位点的方法

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专利权人:

云南省农业科学院农业环境资源研究所

发明人:

李明菊,陈万权,刘太国,段霞瑜,张庆,程加省,毕云青,徐志

申请号：

CN201410137952.8

公开号：

CN103882141A

申请日:

2014.04.08

申请国别(地区):

中国

年份:

2014

代理人:

汤东凤

摘要：

一种用于检测小麦条锈菌细胞周期依赖性蛋白激酶2基因（Cdc2）SNP位点的方法，使用引物对条锈菌DNA在本发明规定的反应体系和反应条件下进行PCR扩增，然后测序，经过与标准序列比对，从而检测到所测序列的SNP位点，引物对：正向引物Cdc28S：5'AAATCATCCACATCTGCTCCAC3'，反向引物Cdc352A：5'TCCTACAAACCCCTCCAA3'。PCR反应体系：为30μl，其中，样品DNA，20ng/μl，1.5μl；PrimerS和A（10μM）各1.5μl；2×TaqPCRMasterMix，15μl；ddH2O，10.5μl。2×TaqPCRMasterMix成分：0.1UTaqPolymerase/μl，500μMdNTPeach，20mMTris-HCl(PH8.3)，100mMKCl，3mMMgCl₂，其它稳定剂和增强剂。PCR反应条件：（96℃，5min）1cycle；（96℃，25s，62℃，25s，72℃，45s）34cycles；72℃延伸5min。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/