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用于生产草酸脱羧酶的重组质粒、大肠杆菌表达系统及方法和应用
- 专利权人:
- 武汉康复得生物科技股份有限公司
- 发明人:
- 汪小锋,吴玉峰,汪卫,刘艳红,陈火晴
- 申请号：
- CN201810865726.X
- 公开号：
- CN108977455A
- 申请日:
- 2018.08.01
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了用于生产草酸脱羧酶的重组质粒、大肠杆菌表达系统及方法和应用。所述用于生产草酸脱羧酶的重组质粒,包含:草酸脱羧酶基因、分子伴侣基因和调控胞内锰离子浓度的基因。本发明将所述重组质粒导入大肠杆菌表达菌株和MntP基因缺失的大肠杆菌中,均得到可溶表达且有活性的草酸脱羧酶。并对重组菌株的培养温度和诱导温度进行了优化,发现培养温度为37℃,诱导温度为25℃时,草酸脱羧酶的表达量较高。通过有机溶剂沉淀和硫酸铵沉淀两步简单纯化,草酸脱羧酶比活力能达到45.6U/mg,纯度超过95%。本发明技术方案具有生产和纯化工艺简单,草酸脱羧酶的表达量和比活力高,易于工业放大,成本低,有利于草酸脱羧酶的工业化生产和应用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
