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生产草酸氧化酶的大肠杆菌表达系统、草酸氧化酶的生产方法及其应用
- 专利权人:
- 武汉康复得生物科技股份有限公司
- 发明人:
- 汪小锋,吴玉峰,汪卫,刘艳红,陈火晴
- 申请号:
- CN201810864547.4
- 公开号:
- CN109022471A
- 申请日:
- 2018.08.01
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了生产草酸氧化酶的大肠杆菌表达系统、草酸氧化酶的生产方法及其应用。所述大肠杆菌表达系统中的重组表达质粒包含:草酸氧化酶基因、分子伴侣基因和促进锰离子泵入大肠杆菌细胞相关蛋白的基因。本发明通过对不同的锰离子相关蛋白的基因及其拷贝数,控制分子伴侣表达的启动子种类,以及草酸氧化酶的生产过程所用的培养基种类进行筛选和测试,获得草酸氧化酶的优化表达组合,使得草酸氧化酶在大肠杆菌中的表达活力超过80U/mL。细胞破碎液上清初步纯化的草酸氧化酶的比活力大于20U/mg,单体分子量大小在25kDa左右。本发明技术方案具有生产和纯化工艺简单,表达量和比活力高,易于工业放大,成本低,有利于这类酶的工业化生产和应用等优势。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/