一种在大肠杆菌中制备线性单链DNA的方法
- 专利权人:
- 百奥迈科生物技术有限公司
- 发明人:
- 张平静,冯文建,杨扬,王晋康,朱远源
- 申请号：
- CN201610464596.X
- 公开号：
- CN106119269A
- 申请日:
- 2016.06.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 贾师英
- 摘要：
- 本发明公开了一种用于制备线性单链DNA的方法，其包括：构建可表达Cas切口酶的Cas表达元件，整合入质粒；构建可在大肠杆菌细胞中与上述Cas表达元件兼容的sgRNA基因转录表达元件，并构建成质粒，得到sgRNA表达质粒；将Cas切口酶表达质粒和sgRNA表达质粒共同转化到大肠杆菌感受态细胞中；培养大肠杆菌至对数生长期，诱导Cas切口酶基因表达和自杀性sgRNA表达，Cas切口酶协同sgRNA自剪切sgRNA表达质粒的双链DNA并形成单链断裂，产生线性单链DNA；提取线性单链DNA。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
