A polypeptide comprises an insulin B-chain sequence having the substitutions: Asp at position B10, Ala at position B12, and Glu at position B29, relative to wild type insulin. The polypeptide may additionally comprise a substitution of a halogenated phenylalanine at position B24, such as ortho-fluoro-phenylalanine. Optionally, the polypeptide may additionally comprise a C-terminal dipeptide extension wherein at least one amino acid in the dipeptide contains an acidic side chain, such as Glu-Glu, and/or an N-terminal deletion of one, two or three residues from the B chain. An insulin analogue may comprise any of these polypeptides with an insulin A-chain polypeptide that optionally contains a Glu A8 substitution. The A- chain sequence may be a separate polypeptide or it may be joined to the B-chain polypeptide by a two amino acid linker. The linker may be Trp-Lys or Ala-Lys. The insulin analogue may be used to treat a patient with diabetes mellitus.L'invention concerne un polypeptide comprenant une séquence de chaîne B de l'insuline comportant les substitutions suivantes : Asp en position B10, Ala en position B12 et Glu en position B29, par rapport à l'insuline de type sauvage. Le polypeptide peut aussi comprendre une substitution d'une phénylalanine halogénée en position B24, par exemple l'ortho-fluoro-phénylalanine. Éventuellement, le polypeptide peut par ailleurs comprendre une extension dipeptidique C-terminale où au moins un acide aminé du dipeptide contient une chaîne latérale acide, par exemple Glu-Glu, et/ou une délétion N-terminale d'un, deux ou trois résidus à partir de la chaîne B. Un analogue de l'insuline peut comprendre l'un quelconque de ces polypeptides avec un polypeptide de chaîne A d'insuline qui contient éventuellement une substitution Glu A8. La séquence de chaîne A peut être un polypeptide séparé, ou elle peut être reliée au polypeptide de chaîne B par un lieur à deux acides aminés. Le lieur peut être Trp-Lys ou Ala-Lys. L'analogue de l'insuline
