A method for manufacturing a new three-dimensional tissue piece that can function as a biological pacemaker is provided.A method for producing a pacemaker tissue piece, comprising forming a three-dimensional tissue piece in which pacemaker cells derived from pluripotent stem cells are laminated, wherein the three-dimensional tissue piece comprises a pacemaker cell and an extracellular matrix component Wherein the formation of the three-dimensional tissue piece is carried out by laminating and culturing the coated cells in which the surface of the pacemaker cells is coated with a film containing an extracellular matrix component, or by culturing the cell layer of the pacemaker cells and the extracellular matrix component And a step of culturing the pacemaker tissue piece by alternately stacking and layering the pacemaker tissue piece.バイオロジカルペースメーカーとして機能しうる新たな三次元組織片の製造方法を提供する。多能性幹細胞に由来するペースメーカー細胞が積層された三次元組織片を形成することを含む、ペースメーカー組織片の製造方法であって、前記三次元組織片は、ペースメーカー細胞と細胞外マトリックス成分とを含み、前記三次元組織片の形成は、ペースメーカー細胞の表面が細胞外マトリックス成分を含む被膜で被覆された被覆細胞を積層して培養すること、又は前記ペースメーカー細胞の細胞層と前記細胞外マトリックス成分を含む層とを交互に積層して培養することを含む、ペースメーカー組織片の製造方法に関する。