The present invention relates to a method for preparing a sterilization composition which is capable of maximizing antibacterial activities and to a sterilization method using the same. By following the method for preparing the sterilization composition: excessive use of chlorite and acid is prevented; production of main sterilizing substance is increased so that excellent sterilization composition which maximizes the antibacterial activities can be prepared; and the sterilization composition prepared by the same has drastically high microbicidal activities for various microorganisms so that the sterilization composition can be usefully applied to various objects such as food and tools for food related fields. [Reference numerals] (AA,EE) Concentration (mg/l); (BB,FF) Chlorine dioxide; (CC,GG) Chlorine; (D1) Comparative example 1; (D10) Example 4; (D11) Example 5; (D2) Comparative example 3; (D3) Comparative example 4; (D4) Comparative example 5; (D5) Comparative example 6; (D6) Comparative example 7; (D7) Example 1; (D8) Example 2; (D9) Example 3; (H1) Comparative example 2; (H10) Example 9; (H11) Example 10; (H2) Comparative example 8; (H3) Comparative example 9; (H4) Comparative example 10; (H5) Comparative example 11; (H6) Comparative example 12; (H7) Example 6; (H8) Example 7; (H9) Example 8본 발명은 물질의 항균효과를 극대화할 수 있는 살균 조성물 제조방법 및 이를 이용한 살균방법에 관한 것으로, 본 발명의 살균 조성물 제조방법에 따라, 아염소산염과 산의 과다 사용은 방지하면서도 주요 살균 물질의 생성량을 증대시킴으로써 물질의 항균효과를 극대화할 수 있는 우수한 살균 조성물을 제조할 수 있으며, 이와 같이 제조된 살균 조성물은 다양한 미생물에 대해 현저히 높은 살균 효과를 가짐으로써 식품 및 관련 분야의 다양한 기구 등을 비롯하여 광범위한 대상에 대해 유용하게 적용될 수 있다.