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Human genetic correction
专利权人:
오레곤 헬스 앤드 사이언스 유니버시티
发明人:
미탈리포브 슈크라트 엠,마티 구티에레즈 누리아
申请号:
KR1020197032695
公开号:
KR1020190140950A
申请日:
2018.04.20
申请国别(地区):
KR
年份:
2019
代理人:
摘要:
Disclosed are methods for correcting mutant alleles of genes of interest in primate cells. The method comprises the steps of: a) introducing into a primate cell an unnaturally generated targeted nuclease and site specific nucleotide binding guide that work together to introduce a double stranded break in the mutant allele, wherein i) Primate cells are in the process of mitotic cell division; ii) said primate cell comprises a genome heterozygous for a mutant allele, said genome comprising a copy of the mutant allele and a copy of the wild type allele; iii) wherein the single stranded oligonucleotide homologous to the wild type allele is not introduced into primate cells. The method also allows b) said primate cells to activate homologous directed repair of double stranded DNA breaks in mutant alleles, correcting mutant alleles using normal wild type alleles as repair templates, and wild type alleles. Producing primate cells homozygous for. Primate cells can be unicellular embryos and / or human cells.영장류 세포에서 관심 유전자의 돌연변이체 대립유전자를 교정하는 방법을 개시한다. 본 방법은 a) 함께 작용하여 돌연변이체 대립유전자에 이중 가닥 파단을 도입하는 비자연적으로 발생된 표적화된 뉴클레아제 및 부위 특이적 뉴클레오티드 결합 가이드를 영장류 세포 내로 도입하는 단계로서, 여기서, i) 상기 영장류 세포는 유사 세포 분열 중이고; ii) 상기 영장류 세포는 돌연변이체 대립유전자에 대해 이형접합성인 게놈을 포함하여, 상기 게놈은 돌연변이체 대립유전자 한 카피 및 야생형 대립유전자 한 카피를 포함하고; iii) 상기 야생형 대립유전자에 상동성인 단일 가닥 올리고뉴클레오티드는 영장류 세포 내로 도입되지 않는 것인 단계를 포함한다. 본 방법은 또한 b) 상기 영장류 세포가 돌연변이체 대립유전자에서 이중 가닥 DNA 파단의 상동성 지정 수복을 활성화하도록 하여, 수복 주형으로서 정상 야생형 대립유전자를 사용하여 돌연변이체 대립유전자를 교정하고, 야생형 대립유전자에 대해 동형접합성인 영장류 세포를 생산하는 단계를 포함한다. 영장류 세포는 단세포 배아 및/또는 인간 세포일 수 있다.
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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