PURPOSE: A method for enhancing cryopreservation efficiency for spermatogonial stem cells is provided to develop method such as human infertility treatment.CONSTITUTION: A cryopreservation method for spermatogonial stem cells comprises: a step of treating enzyme to testis of a mammal to separate single cell group a step of collecting spermatogonial stem cells from the single cell group a step of culturing the spermatogonial stem cell in vitro and collecting and a step of cryopreservating the stem cells using cryopreservation liquid containing polyethylene glycol. The enzyme is collagenase, hyaluronidase, trypsin, Dnase I or mixture thereof.COPYRIGHT KIPO 2012본 발명은 정원줄기세포의 장기간 보존 효율성을 증진시키는 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로 동결보존액에 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol)을 첨가한 동결보존법을 이용하여 정원줄기세포의 보존성을 증가시키는 방법을 제공하는 것이다.본 발명의 정원줄기세포 동결보존 기법을 따르면, 동결보존 및 해동 후 정원줄기세포의 생존율 증진을 확인할 수 있기 때문에 효율적인 동결보존을 통해 우수종축의 형질 보존 연구 분야의 발전뿐 아니라 인간 불임치료와 같은 적극적인 활용법 개발에 획기적인 발전을 기대할 수 있다.