A method for engineering less alloreactive immune cells, including T-cells that express chimeric antigen receptors (CARs), using a nucleotide sequence in form of an RNA encoding a anti-TCR CAR to achieve the transient expression of anti- TCR CAR at the cellsurface. The transient expression of the anti-TCR CAR recognized by the alpha beta TCR on the cell surface unexpectedly enabled the a purification of the TCR-negative CAR expressing cells. The TCR-negative CAR expressing immune cells can be used in adoptive therapy to treat diseases associated with cell surface antigens, such as cancer with less side effects, in particular less GVHD.L'invention concerne un procédé d'ingénierie de cellules immunitaires moins alloréactives, comprenant des lymphocytes T qui expriment des récepteurs d'antigènes chimériques (CAR), à l'aide d'une séquence nucléotidique sous la forme d'un ARN codant pour un CAR anti-TCR pour obtenir l'expression transitoire de CAR anti-TCR au niveau de la surface cellulaire. L'expression transitoire du CAR anti-TCR reconnue par le TCR alpha bêta sur la surface cellulaire a permis de manière inattendue la purification des cellules exprimant CAR TCR-négatif. Les cellules immunitaires exprimant CAR TCR-négatif peuvent être utilisées dans une thérapie adoptive pour traiter des maladies associées à des antigènes de surface cellulaire, tels que le cancer avec moins d'effets secondaires, en particulier moins de GVHD.
