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一种串联RAD标签测序文库的构建方法
- 专利权人:
- 中国海洋大学
- 发明人:
- 王师,包振民,刘平平,吕佳,张玲玲
- 申请号:
- CN201610629494.9
- 公开号:
- CN106192021A
- 申请日:
- 2016.08.02
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 尚欣
- 摘要:
- 本发明公开了一种串联RAD标签测序文库的构建方法,步骤为:1)酶切:利用内切酶对DNA进行酶切反应;2)接头连接:对酶切片段分别连接接头,接头设计有SapI酶的酶切位点和用于实现标签串联的特征序列以及扩增引物结合的通用序列;3)连接产物扩增:利用生物素引物和普通引物组合进行PCR扩增,富集,切胶回收PCR产物,再次扩增,等量混合纯化;4)串联标签文库:利用SapI酶对PCR产物进行酶切,依次串联;5)串联长标签富集:串联长标签经凝胶纯化后利用引物进行PCR扩增,引入barcode构建文库;6)文库测序本发明能够实现对全基因组范围遗传标记和表观遗传变异进行高通量、低成本地筛查和检测。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/