The purpose of the present invention is to provide a method for easily and highly efficiently creating a genetically modified nonhuman mammal with the use of a CRISPR-Cas9 system, in particular, a creation method that enables highly efficient gene knock-in regardless of gene size.A method for creating a genetically modified nonhuman mammal, said method comprising introducing, into an oocyte of a nonhuman mammal, a Cas9 protein, a crRNA fragment containing a base sequence complementary to a target DNA region and a tracr RNA fragment and thus genetically modifying the target DNA.La présente invention a pour objet un procédé permettant la création de façon facile et hautement efficace dun mammifère non humain génétiquement modifié à laide dun système CRISPR-Cas9, en particulier un procédé de création qui permet lactivation hautement efficace de gènes indépendamment de la taille des gènes. Le procédé permettant la création dun mammifère non humain génétiquement modifié selon la présente invention comprend lintroduction, dans un ovocyte dun mammifère non humain, dune protéine Cas9, dun fragment dARNcr contenant une séquence de bases complémentaire à une région dADN cible et dun fragment dARNtracr et donc la modification génétique de lADN cible.CRISPR-Cas9システムを利用した簡便で、かつ高効率の遺伝子改変非ヒト哺乳動物の作製方法、特に、遺伝子サイズに関係なく、高効率にて遺伝子ノックインを可能とする作製方法を提供することを目的とする。 Cas9タンパク質、標的DNA領域と相補的な塩基配列を含むcrRNA断片及びtracr RNA断片を非ヒト哺乳動物の卵母細胞に導入し、該標的DNAを遺伝子改変することを含む、遺伝子改変された非ヒト哺乳動物の作製方法。
