The present application provides methods of preparing tumor antigen-specific T cells comprising enriching activated T cells from a first co-culture comprising a first population of antigen-loaded dendritic cells loaded and a population of T cells, and co-culturing the enriched activated T cells with a second population of antigen-loaded dendritic cells. Also provided are methods of treating cancer in an individual using the tumor antigen-specific T cells, pharmaceutical compositions and kits for cell-based cancer immunotherapy.La présente invention concerne des procédés de préparation de lymphocytes T spécifiques d'un antigène tumoral comprenant l'enrichissement de lymphocytes T activés à partir d'une première co-culture comprenant une première population de cellules dendritiques chargées d'antigènes et une population de lymphocytes T, et la co-culture des lymphocytes T activés enrichis avec une seconde population de cellules dendritiques chargées d'antigènes. L'invention concerne également des procédés de traitement du cancer chez un individu à l'aide des lymphocytes T spécifiques d'un antigène tumoral, des compositions pharmaceutiques et des kits pour l'immunothérapie anticancéreuse à base de cellules.