The present invention, step growing a culture of cells expressing a) bacterial cytolysin prefiltration and c) extract steps of preparing an extract by mechanically breaking the culture of b) Cell in the presence of a surfactant, salt) conditions 0.6~2 M (preferably high salt, hydrophobic interactions, bacterial cytolysin aggregated soluble contained in d) extract steps of: step is combined with chromatographic material in the presence of e) and surfactant, salt) conditions 0~0.2 M (preferably low salt comprises, eluting bacterial cytolysin, bacterial method for purifying cytolysin. None [Selection Figure]本発明は、a)細菌性細胞溶解素を発現する細胞の培養物を増殖させるステップ;b)細胞の培養物を機械的に破壊して抽出物を調製するステップ;c)抽出物を前濾過するステップd)抽出物中に含まれる可溶性の凝集した細菌性細胞溶解素を、界面活性剤の存在下で、高塩(好ましくは0.6~2 Mの塩)条件下で、疎水性相互作用クロマトグラフィー材料と結合させるステップ;およびe)界面活性剤の存在下で、低塩(好ましくは0~0.2 Mの塩)条件下で、細菌性細胞溶解素を溶出させるステップ、を含む、細菌性細胞溶解素の精製方法に関する。【選択図】なし