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共表达PRRSV ORF5及ORF6双基因核酸疫苗的制备方法
- 专利权人:
- 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
- 发明人:
- 王金宝,李俊,任慧英,吴家强,张秀美,温建新,周顺,徐绍建
- 申请号:
- CN200810014058.6
- 公开号:
- CN101401937A
- 申请日:
- 2008.01.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2009
- 代理人:
- 姜 明
- 摘要:
- 本发明提供一种共表达猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)ORF5及ORF6双基因核酸疫苗的制备方法,该方法是通过RT-PCR方法分别扩增PRRSV ORF5及ORF6的全基因序列,并将2个基因插入哺乳动物真核表达载体pIRES的2个多克隆位点,获得重组质粒pIRES-ORF5及ORF6,将重组质粒转染CHO细胞,建立稳定表达的细胞系,通过RT-PCR方法检测到PRRSV ORF5及ORF6基因的转录,通过SDS-PAGE和Western blot检测到GP5及M蛋白的表达和免疫活性。该核酸疫苗可在动物体内持续不断的产生GP5蛋白及M蛋白,使机体不断产生针对两者的抗体,对猪体提供持久的免疫保护力,在PRRS的防控中具有广阔的应用前景。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/