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共表达PRRSV ORF5和PCV2 ORF2双价核酸疫苗的制备方法
- 专利权人:
- 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
- 发明人:
- 王金宝,李俊,任慧英,吴家强,张秀美,周顺,温建新,赵鸿雁
- 申请号：
- CN200810014054.8
- 公开号：
- CN101401936A
- 申请日:
- 2008.01.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2009
- 代理人:
- 姜 明
- 摘要：
- 本发明猪繁殖与综合症病毒和猪圆环病毒双价核酸疫苗的制备方法，简称共表达PRRSV ORF5和PCV2 ORF2双价核酸疫苗的制备方法，本发明根据哺乳动物细胞真核表达载体pIRES MCSA MCSB多克隆位点的序列和PRRSV SD1株ORF5和PCV SD1株的ORF2基因阅读框架，同时考虑外源基因的表达量在基因起始密码子的前面加入Kozak序列，分别设计了针对ORF5、ORF2的引物Y1/Y2，H1/H2。将PCR产物ORF2经双酶切回收后插入真核表达载体pIRES得到pIRES-ORF2，RT-PCR产物ORF5经双酶切回收后插入pIRES-ORF2构建成重组质粒pIRES-ORF2/ORF5。经PCR、RT-PCR、双酶切及测序鉴定，证明成功构建了转移载体pIRES-ORF2/ORF5。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
