您的位置: 首页 > 农业专利 > 详情页

Method for identifying the polymorphic sequences 4a/4b of the nitric oxide endothelial synthetase gene
专利权人:
INSTITUTUL DE ZOOLOGIE AL ACADEMIEI DE ŞTIINŢE A MOLDOVEI
发明人:
TODERAŞ Ion,ТОДЕРАШ Ион,MOVILĂ Alexandru,МОВИЛЭ Александру,CAPROŞ Natalia,КАПРОШ Наталия,ISTRATI Valeriu,ИСТРАТИ Валериу,TODERAŞ Lidia,ТОДЕРАШ Лидия
申请号:
MDS20130005
公开号:
MD707Z
申请日:
2013.01.18
申请国别(地区):
MD
年份:
2014
代理人:
摘要:
The invention relates to the medical molecular genetics, namely to a method for identifying the polymorphic sequences 4a/4b of the nitric oxide endothelial synthetase gene.Summary of the method consists in that is carried out the whole blood sampling, is extracted DNA with 0.7 M ammonium hydroxide, is maintained at room temperature for 5 minutes and incubated in a thermostat at the temperature of 100°C for 30 minutes with continuous stirring, then the extracted the DNA is amplified using sense NOS3: 5-GCCCTATGGTAGTAGTGCCTTT-3 and antisense NOS3 primers: 5-SCTCTTAGTGCTGTGGTCA-3, at the same time is carried out the initial denaturation at the temperature of 94°C for 3 min, then are performed 30 cycles with denaturation at the temperature of 94°C for 1 min, at the temperature of 54°C for 30 seconds, at the temperature of 72°C for 30 seconds and at the temperature of 72°C for 5 minutes, are separated the amplified DNA fragments in 1.8% agarose gel, are stained with 0.5 µg/mL solution of ethidium bromide and are identified the polymorphic sequences.Invenţia se referă la genetica medicală moleculară, şi anume la o metodă de identificare a secvenţelor polimorfe 4a/4b ale genei sintetazei endoteliale a oxidului nitric.Esenţa metodei constă în aceea că se colectează proba integrală de sânge, se extrage ADN cu hidroxid de amoniu 0,7 M, se menţine la temperatura camerei timp de 5 min şi se incubează într-un termostat la temperatura de 100ºC timp de 30 min cu agitare continuă, apoi ADN extras se amplifică cu utilizarea primerilor NOS3 sens: 5´-GCCCTATGGTAGTAGTGCCTTT-3´ şi NOS3 antisens: 5´- CCTCTTAGTGCTGTGGTCA-3´, totodată se efectuează denaturarea iniţială la temperatura de 94°C timp de 3 min, apoi se efectuează 30 de cicluri cu denaturarea la temperatura de 94°C timp de 1 min, la temperatura de 54°C timp de 30 s, la temperatura de 72°C timp de 30 s şi la temperatura de 72°C timp de 5 min, se separă fragmentele amplificate de ADN în gel de agaroză de 1,8%, se colorează cu o so
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

意 见 箱

匿名:登录

个人用户登录

找回密码

第三方账号登录

忘记密码

个人用户注册

必须为有效邮箱
6~16位数字与字母组合
6~16位数字与字母组合
请输入正确的手机号码

信息补充