Methods for preparation of a heat stable hemoglobin based oxygen-carrier-containing pharmaceutical composition such that beta-beta cross-linking is favored are provided. Using the methods of the present invention, the oxygen affinity of the resultant molecule can be controlled so that hemoglobin based oxygen carriers tailored for specific applications can be produced. Lower oxygen affinity crosslinked hemoglobin is useful for applications requiring rapid tissue oxygenation (e.g. hemorrhagic shock) while higher oxygen affinity cross-linked hemoglobin is useful for applications requiring a slower rate of oxygenation (e.g. cancer adjunct therapy). A highly purified and heat stable crosslinked non-polymeric tetrameric hemoglobin having beta-beta cross-linking of greater than 40-60% and suitable for use in mammals without causing renal injury and vasoconstriction is produced. A high temperature and short time (HTST) heat processing step is performed to effectively remove any undesired dimeric hemoglobin, non-crosslinked tetrameric hemoglobin, and plasma protein impurities.Esta solicitud de invención está relacionada a un método para la preparación de una composición farmacéutica que contiene un portador de oxígeno resistente al calor, donde dicho portador es hemoglobina tetramérica entrecruzada no polimérica. El entrecruzamiento se puede realizar en un ambiente oxigenado o desoxigenado. Se reivindican los pasos del método, los que incluyen proveer de sangre entera de mamífero, la separación de glóbulos rojos del plasma sanguíneo, su filtrado, lavado y ruptura, para la extracción de hemoglobina. El método utiliza DBSF (bis-(3,5 dibromosalicil) fumarato) como agente de entrecruzamiento (cross-link) y tratamiento con calor en un ambiente desoxigenado para remover la hemoglobina residual. El proceso termina al agregar la hemoglobina entrecruzada tetramérica estable al calor a un portador farmacéuticamente aceptable. Se reivindica la composición farmacéutica resultante del pr
