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一种中华鲟VTG蛋白抗原及抗体及制备方法和应用
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院长江水产研究所
- 发明人:
- 冷小茜,危起伟,李创举,杜浩,叶欢
- 申请号:
- CN201610932965.3
- 公开号:
- CN106632643A
- 申请日:
- 2016.10.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要:
- 本发明公开了一种中华鲟VTG蛋白抗原及抗体及制备方法和应用,步骤是:1.重组中华鲟VTG蛋白抗原制备:1)设计上游引物,下游引物,扩增结构域截短序列;2)将pMD‑18T‑VTG质粒及Pet32a(+)空载体分别采用EcoRI和XhoI进行酶切后纯化目的片段,将二者连接为Pet32a(+)‑VTG转化DH5a,涂于含有氨苄青霉素的LB培养基上培养;3)将Pet32a(+)‑VTG质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,涂于含有氨苄青霉素的LB固体培养基上培养;4)将收集的菌体沉淀,用含8M尿素的蛋白缓冲液重悬沉淀,过滤收集上清得到重组蛋白。2.重组中华鲟VTG蛋白抗原免疫日本大耳兔获得中华鲟VTG蛋白抗体。3.中华鲟VTG蛋白抗原及抗体的用途。中华鲟VTG蛋白抗体与VTG蛋白抗原免疫性好,效价能达到1:1000,检测结果阳性率高,具有良好的临床适用性。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/