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一种制备纯化抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白的方法
- 专利权人:
- 辽宁大学
- 发明人:
- 胡风庆,张庆岩,回晶
- 申请号:
- CN201510795923.5
- 公开号:
- CN105255975A
- 申请日:
- 2015.11.18
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明涉及一种制备纯化抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白的方法。将重组菌接种于新鲜LB培养基中,摇瓶培养至OD值为0.5-0.6;加入诱导剂,于30-37℃下诱导4-8h,离心,将沉淀于-20℃冷冻后,用平衡缓冲液将沉淀悬起,加溶菌酶,破碎菌体,离心,收集上清液;滤膜过滤上清液,经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,得到带组氨酸标签的抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白溶液;用蒸馏水稀释,超滤除盐,再用肠激酶缓冲液稀释,再超滤浓缩,最后用肠激酶酶切去除组氨酸标签,再经过Ni-NTA亲和层析柱得到纯化的抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白。本发明能得到大量抗肿瘤溶栓双效融合蛋白,为其将来在治疗肿瘤及溶栓方面发挥重要作用奠定了基础。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/