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一种具有转糖苷活性耐热β-半乳糖苷酶突变体及其制备方法
- 专利权人:
- 江南大学
- 发明人:
- 陈海琴,董艺凝,陈卫,赵建新,陈永泉,张灏
- 申请号：
- CN201610580177.2
- 公开号：
- CN105950589A
- 申请日:
- 2016.07.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 邢大文
- 摘要：
- 本发明提供一种转糖苷活性耐热β‑半乳糖苷酶突变体，该突变体是通过对β‑半乳糖苷酶BgaB催化氨基酸位点E303由原谷氨酸(Glu)定点突变为半胱氨酸(Cys)，再将半胱氨酸巯基氧化为‑SOO‑所得。本发明还设计所述突变体的制备方法与应用。本发明以嗜热脂肪芽孢杆菌来源β‑半乳糖苷酶BgaB为对象，采用定点突变体与化学修饰结合的方法，显著加快了转糖苷活性的功能进化效率，并提高了低聚半乳糖的合成量，实现在中温、中性环境下的低聚半乳糖合成量由野生型酶的0％提高到11.5％，突破了现有技术中需要在酸性环境下进行反应的局限，同时避免了在低聚半乳糖合成的同时发生底物或产物的水解。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
