一种分离、纯化金钗石斛原生质体的方法和专用试剂配方

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专利权人:

遵义医学院

发明人:

徐德林,储士润,张林,杨璐萍,钱刚

申请号：

CN201410671534.7

公开号：

CN104357377A

申请日:

2014.11.21

申请国别(地区):

中国

年份:

2015

代理人:

刘学诗

摘要：

一种分离、纯化金钗石斛原生质体的方法和专用试剂配方。专用试剂溶液A和溶液B，A由MES、KCl、Mannitol、CellulaseR10、PectolyaseY-23、MacerozymeR-10、BSA、CaCl₂和ddH₂O。溶液B由MES、KCl、Mannitol、BSA、CaCl₂、ddH₂O。该试剂制备原生质体步骤：（1）将金钗石斛植株放黑暗处培养12h，取幼嫩饱满叶片无菌处理后剪碎；（2）在摇床上用溶液A黑暗处理（1）碎片释放出原生质体；（3）将（2）获得的原生质体溶液过200目细胞筛过滤，滤液离心2-8min，用溶液B溶解沉淀物，反复离心；（4）用FDA对（3）纯化的原生质体活力检测。用本法制的原生质体密度大、纯度高、活力强。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/