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process for periplasmic expression of a bacterial toxoid
专利权人:
GLAXOSMITHKLINE BIOLOGICALS S.A.
发明人:
PHILIPPE GOFFIN,PHILIPPE MARC HELENE DEHOTTAY
申请号:
BR112013025612
公开号:
BR112013025612A2
申请日:
2012.04.12
申请国别(地区):
BR
年份:
2016
代理人:
摘要:
Process for Periplasmic Expression of a Bacterial Toxoid The present invention provides a process for periplasmic expression of a bacterial toxoid comprising the steps of: a) growing a culture of a gram negative host cell in a fermentation medium, wherein the host cell is transformed with a polynucleotide, wherein the polynucleotide encodes the bacterial toxoid and a periplasmic signaling sequence; or providing a gram negative host cell wherein the host cell is transformed with a polynucleotide, the polynucleotide encodes the bacterial toxoid and a periplasmic signaling sequence and wherein the gram negative host cell comprises the bacterial toxoid expressed in the periplasm; (i) induce bacterial toxoid expression; b) maturing the host cell, wherein the maturing step comprises: i) subjecting the host cell to a ph shock; ii) incubating the host cell without addition of feed; and / or iii) subjecting the host cell to a temperature below -20 ° C; and c) extracting the bacterial toxoid from the host cell wherein the extraction process comprises osmotic shock.processo para expressão periplásmica de um toxoide bacteriano a presente invenção fornece um processo para expressão periplásmica de um toxoide bacteriano compreendendo as etapas de: a) crescer uma cultura de uma célula hospedeira gram negativa em um meio de fermentação, em que a célula hospedeira está transformada com um polinucleotídeo, em que o polinucleotídeo codifica o toxoide bacteriano e uma sequência de sinalização periplásmica; ou fornecer uma célula hospedeira gram negativa em que a célula hospedeira está transformada com um polinucleotídeo, o polinucleotídeo codifica o toxoide bacteriano e uma sequência de sinalização periplásmica e em que a célula hospedeira gram negativa compreende o toxoide bacteriano expressado no periplasma; a(i)) induzir a expressão do toxoide bacteriano; b) maturar a célula hospedeira, em que a etapa de maturar compreende: i) submeter a célula hospedeira a um choque de ph; ii) incu
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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