KRIEGER, Marco Aurélio,KESSLER, Rafael Luis,PRETI, Henrique,LUDWIG, Adriana,SOARES, Luis Roberto Benghi,SOARES, Luis Roberto
申请号：
BRBR2017/050242
公开号：
WO2018/161135A1
申请日:
2017.08.24
申请国别(地区):
BR
年份:
2018
代理人:
摘要：
The present invention describes i) the construction of synthetic genes for components of a recombinant fibrin glue: fibrinogen A, fibrinogen B, fibrinogen G, factor XIIIA, prothrombin, ecarin and ERp57； ii) the expression of said genes in genetically modified CHO cells to achieve high levels of expression； iii) the increase in fibrinogen expression by the coexpression of ERp57； iv) the scaling of said expression system in a bioreactor； v) the purification of the glue components using chromatographic methods； vi) the formulation of the glue components for use as a surgical adjunct.La présente invention concerne i) la construction de gènes synthétiques pour composants d'une colle de fibrine recombinante : fibrinogène A, fibrinogène B, fibrinogène G, facteur XIIIA pro-thrombine, écarine et ERp57 ； l'expression de ces gènes dans des cellules CHO génétiquement modifiées pour atteindre de hauts niveaux d'expression ； iii) l'augmentation de l'expression de fibrinogène par co-expression d'ERp57 ； iv) l'échelonnement de ce système d'expression dans un bioréacteur ； v) la purification des composants de la colle au moyen de procédés chromatographiques ； vi) la formulation des composants de la colle pour application comme complément chirurgical.A presente invenção descreve i) a construção de genes sintéticos para componentes de uma cola de fibrina recombinante: Fibrinogênio A, Fibrinogênio B, Fibrinogênio G, Fator XIIIA, pró-trombina, ecarina e ERp57； ii) expressão de tais genes em células CHO geneticamente modificadas para alcançar altos níveis de expressão； iii) aumento de expressão de fibrinogênio pela co- expressão de ERp57； iv) escalonamento deste sistema de expressão em biorreator； v) purificação dos componentes da cola por métodos cromatográficos； vi) formulação dos componentes da cola para aplicação como suplemento cirúrgico.
