牛呼吸道合胞体病毒nano‑PCR检测试剂盒及其制备方法,涉及牛呼吸道合胞体病毒检测领域,解决了现有牛呼吸道合胞体病毒检测方法灵敏性低、血清学检测假阳性高、成本高的问题。该试剂盒包括MightyAmp酶、2xBuffer Mix缓冲液、金纳米颗粒溶胶、无菌双蒸水、一对特异性引物和一个牛呼吸道合胞体病毒阳性对照质粒;一对特异性引物分别为P1(5'‑TATGCTATGTCCCGATTGG‑3')和P2(5'‑ACTGATTTGGCTAGTACACCC‑3'),牛呼吸道合胞体病毒阳性对照质粒的序列如序列表中的SEQ ID NO:2所示。该试剂盒灵敏度高、简便、成本低。