The content of (6S) -5-methyltetrahydrofolic acid or a salt thereof is 98.0% or more, the content of JK12A as a related impurity is 0.1% or less, and 5-methyltetrahydropteroic acid is detected. The composition of (6S) -5-methyltetrahydrofolic acid or its salt and its preparation and application, which should not be done.(6S)-5-メチルテトラヒドロ葉酸又はその塩の含有量が98.0%以上であり、関連不純物であるJK12Aの含有量が0.1%以下であり、5-メチルテトラヒドロプテロイン酸が検出されてはならない、(6S)-5-メチルテトラヒドロ葉酸又はその塩の組成物及びその調製と応用である。