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农杆菌EHA105介导地细基江蓠繁枝变种转基因方法
- 专利权人:
- 厦门大学
- 发明人:
- 王克坚,何艺宾,彭会
- 申请号:
- CN201711465054.5
- 公开号:
- CN108179153A
- 申请日:
- 2017.12.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 马应森
- 摘要:
- 农杆菌EHA105介导地细基江蓠繁枝变种转基因方法,涉及细基江蓠繁枝变种转基因的方法。将长外植体培养于含茉莉酸甲酯、激动素、2,4‑D和卡那霉素的MES培养基中诱导愈伤组织,培养后,观察并统计愈伤的诱导率;用接菌环挑取农杆菌EHA105,接种在LB液体培养基中培养,隔天按质量百分比1%~2%接种到新鲜的LB培养基中,振荡培养,进行二次活化;当OD600为0.4~0.5时,收集菌液于无菌离心管中,离心,去上清,用无菌海水重悬,得重悬农杆菌菌液;将获得的愈伤组织接种到重悬农杆菌菌液中培养后,愈伤组织用含羧苄青霉素、卡那霉素的无菌海水清洗后,于荧光显微镜中观察GFP报告基因的表达情况及绿色荧光。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/