UNIVERSITY OF PITTSBURGH- OF THE COMMONWEALTH SYSTEM OF HIGHER EDUCATION
发明人:
EVANS, Jared, D.,BEATTY, Nicole, M.
申请号：
USUS2012/053090
公开号：
WO2013/033362A1
申请日:
2012.08.30
申请国别(地区):
WO
年份:
2013
代理人:
摘要：
Described herein is a method for the production of flavivirus virus-like particles (VLPs) in a yeast system. In some cases, flavivirus structural proteins are expressed in a Pichia pastoris strain and isolated using pressurized mechanical lysis. The disclosed VLPs can be used as immunogenic compositions for the prevention or treatment of flavivirus infection. Also described are isolated nucleic acid molecules encoding a flavivirus capsid (C) protein a flavivirus premembrane (prM) protein and at least one flavivirus envelope (E) protein or a flavivirus E protein lacking the transmembrane domain (ΕΔΤΜ), wherein the nucleic acid molecule further encodes at least one foot and mouth disease virus (FMDV) 2A autocatalytic site (2A) positioned between two flavivirus protein coding sequences. Expression of such nucleic acid molecules in a host cell produces flavivirus VLPs.Cette invention concerne une méthode de production de pseudo-particules virales (VLP) dun flavivirus dans un système de levure. Dans certains cas, les protéines structurelles du flavivirus sont exprimées dans une souche de Pichia pastoris et isolées par lyse mécanique sous pression. Les VLP de linvention peuvent être utilisées en tant que compositions immunogènes pour la prévention ou le traitement de linfection à flavivirus. Linvention concerne également des molécules dacide nucléique isolées codant une protéine de capside (C) du flavivirus une protéine de prémembrane (prM) du flavivirus et au moins une protéine denveloppe (E) ou une protéine E du flavivirus dépourvue du domaine transmembranaire (ΕΔΤΜ), la molécule dacide nucléique codant également au moins un site autocatalytique 2A du virus de la fièvre aphteuse placé entre deux séquences codant la protéine du flavivirus. Lexpression de ces molécules dacide nucléique dans une cellule hôte produit les VLP du flavivirus.
