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嵌合南非2型口蹄疫病毒抗原表位猪细小病毒样颗粒的组装方法及用途
- 专利权人:
- 中国农业科学院兰州兽医研究所
- 发明人:
- 李茜,丁耀忠,马维民,代军飞,汪洋,侯谦,李苗苗,马炳,刘永生,张永光
- 申请号:
- CN202010652309.4
- 公开号:
- CN111778221A
- 申请日:
- 2020.07.08
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明根据计算机软件模拟结果,在猪细小病毒PPV VP2蛋白表面Loop2区和Loop4区后分别嵌入SAT2 FMDV B细胞表位(VYTKAAAAIRGDRAALAAKYADTNHTLPPTFNFGYVTVDK),在N端嵌一个T细胞表位(NVQEGRRKHTDVAFLLDRST)。根据昆虫细胞嗜性优化合成嵌合基因GS1925OP,克隆到载体pFastBacTMDual上,转化大肠杆菌DH10Bac,获得重组杆粒rBacmidNT1L2B4B,转染sf9细胞,收获重组杆状病毒rBacNT1L2B4B,用其感染HF细胞,使用间接免疫荧光IFA针对嵌合表位和VP2蛋白进行检测,具有特异性荧光。Western‑blot针对B、T细胞表位和VP2蛋白进行检测,在70KDa出现一条特异性条带。透射电镜TEM观察,重组蛋白NT1L2B4B能够自我组装成病毒样颗粒。本发明可以应用在为南非2型口蹄疫制备储备疫苗,并能在此基础上达到同时预防南非2型口蹄疫和猪细小病的目的。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/