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一种微环DNA及其制备方法与应用
- 专利权人:
- 吉林农业大学
- 发明人:
- 姜延龙,王春凤,杨桂连,高兴,许可
- 申请号:
- CN201811415132.5
- 公开号:
- CN109536521A
- 申请日:
- 2018.26.11
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2019
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明提供一种微环DNA及其制备方法与应用,该微环DNA含有编码EGFP绿色荧光蛋白报告基因。制备方法包括:在CMV‑EGFP‑polyA阅读框两侧分别引入lox66及lox71位点;用SacII和StuI双酶切扩增产物一,连接后,转化大肠杆菌Top10感受态细胞;将pYL19完整质粒进行PCR扩增,并引入XmaI和PacI酶切位点;将PGK‑cre‑polyA质粒进行PCR扩增,并引入XmaI和PacI酶切位点;用XmaI和PacI双酶切扩增产物二和扩增产物三,连接后,转化大肠杆菌Top10感受态细胞;对pYL46完整质粒提取重组质粒,然后瞬时转染至培养状态良好的人胚肾HEK‑293 T细胞。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/