本发明属于动物传染病检测技术领域,具体涉及一种禽流感H9亚型病毒抗体快速定量检测试剂盒及其应用。本发明可对禽流感H9亚型病毒抗体进行实时、快速动态定量检测,本发明的试剂盒由试纸条、测试卡壳和样品稀释液组成,所述的试纸条由样品垫、吸收垫、涂覆有由保藏号为CCTCC M 2017470的大肠杆菌BL21/pSmart‑H9‑HA表达的HA蛋白‑胶体金标记物、兔IgG-胶体金标记物的结合垫,包被有禽流感H9亚型抗原蛋白HA的第一检测线和第二检测线,包被有羊抗兔IgG的质控线的硝酸纤维素膜,依次按吸收垫、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫的顺序粘贴在不吸水的支撑薄片上构成试纸条。