一种用于检测PRRSV缺失变异株的Taqman Real-time RT-PCR试剂盒及其使用方法,所述试剂盒包含One Step RT-PCR buffer 、酶混合物、阳性对照、无RNA酶水、序列SEQ ID NO:1和 SEQ ID NO:2的引物及SEQ ID NO:3的探针引物的混合物,所述检测方法包括使用所述试剂盒进行RT-PCR扩增的步骤及评定标准。本发明弥补了PRRSV缺失变异株检测上的薄弱环节,与普通RT-PCR方法相比,本发明省时、省力,成本较低,并且比普通PCR的灵敏度高,能快速、敏感、准确以及低成本地对猪繁殖与呼吸综合征缺失变异株病毒进行检测及定量分析。