The present invention relates to a process for the preparation of unilamellar liposomal composition of a polyene antibiotic drug, preferably amphotericin B. The process encompasses the steps of (a) mixing the polyene antibiotic and the phospholipid in an acidified organic solvent, (b) removing the organic solvent and (c) hydrating the dried complex with an aqueous buffer having a pH of 3 to 6.La présente invention concerne un procédé pour la préparation dune composition liposomique unilamellaire dun médicament antibiotique polyénique, de préférence lamphotéricine B. Le procédé comprend les étapes consistant à (a) mélanger lantibiotique polyénique et le phospholipide dans un solvant organique acidifié, (b) éliminer le solvant organique et (c) hydrater le complexe séché avec un tampon aqueux ayant un pH de 3 à 6.