本发明公开了一种抗传染性脾肾坏死病毒的病毒样颗粒和疫苗及其制备方法，所述抗传染性脾肾坏死病毒的病毒样颗粒由同时表达的流感病毒基质蛋白M1和融合蛋白HA-24构成；所述融合蛋白HA-24由流感病毒HA蛋白与鱼类传染性脾肾坏死病毒ORF24构建而成，所述融合蛋白HA-24的核酸序列如SEQ ID NO:3、5、7、9或11所示。所述抗传染性脾肾坏死病毒的病毒样颗粒的制备方法，包括以下步骤：制备融合基因HA-24；制备重组杆状病毒穿梭载体rBacmid；制备重组昆虫杆状病毒；获得同时表达流感病毒基质蛋白M1和融合蛋白HA-24的病毒样颗粒。所述疫苗包含上述任一项所述的病毒样颗粒。本发明混合病毒样颗粒疫苗能引起机体免疫系统产生强型应答，免疫力强，持续时间长，能预防鱼类传染性脾肾坏死病毒病，而且非常安全。
