The present invention relates to a method for preparing spheroids of human primary hepatocytes. The method comprises culturing of isolated human primary hepatocytes on a polysaccharide scaffold under conditions that allow the formation of hepatocyte spheroids, and subsequently dissolving the polysaccharide scaffold to release the hepatocyte spheroids. The spheroids obtained by the method of the invention are particularly suitable for being transplanted into a subject afflicted with a liver disease.La présente invention concerne un procédé pour préparer des sphéroïdes d'hépatocytes primaires humains. Le procédé comprend la culture d'hépatocytes primaires humains isolés sur un échafaudage polysaccharidique dans des conditions qui permettent la formation de sphéroïdes d'hépatocytes, puis la dissolution de l'échafaudage polysaccharidique pour libérer les sphéroïdes d'hépatocytes. Les sphéroïdes obtenus par le procédé de l'invention conviennent particulièrement à la transplantation dans un sujet souffrant d'une maladie hépatique.