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一种快速鉴定南方根结线虫二龄幼虫体外生存状态的方法
- 专利权人:
- 云南大学
- 发明人:
- 邹成钢,陆朝军,张克勤,卞静
- 申请号：
- CN201610235811.9
- 公开号：
- CN105911035A
- 申请日:
- 2016.04.15
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 杨宏珍
- 摘要：
- 一种快速鉴定南方根结线虫二龄幼虫体外生存状态的方法，属农业病原害虫药物筛选领域。本发明应用尼罗红对J2脂肪的染色，根据虫体的着色部位鉴定出二龄幼虫的生存状态。即：将150‑180条J2加入到盛有500μl无菌水的24孔细胞培养板中，向其加1μl经0.22μm过滤器除渣并溶解于丙酮中0.5mg/ml尼罗红溶液，25℃放置4h后，置于用波长为580‑630mm的黄绿色激发光曝光120毫秒，每隔24h重复同样的操作，观测和记录荧光值；当线虫口针到口器顶部的头部呈现出明显的橘红色荧光，判定线虫为死亡状态；当线虫头部基本没有荧光，判定J2为非死亡状态。有益效果在于：操作简单、灵敏度高；多次检测且不影响J2的活力；能够降低假死给杀虫药物筛选带来的统计误差，减少筛选周期和成本。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
