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標的DNAに変異が導入された植物細胞、及びその製造方法
专利权人:
NATIONAL INSTITUTE OF AGROBIOLOGICAL SCIENCES
发明人:
IWAKAMI Masaki,岩上 真咲,TOKI Seiichi,土岐 精一
申请号:
JPJP2015/055230
公开号:
WO2015/129686A1
申请日:
2015.02.24
申请国别(地区):
WO
年份:
2015
代理人:
摘要:
It was discovered that, in a plant cell, a marker gene inserted into the genomic DNA by homologous recombination and having nuclease recognition sites added to both ends thereof can be removed by the corresponding nuclease, and the recognition sites can be removed without leaving a trace by matching the sequence of at least 30 nucleotides adjacent to the nuclease recognition sites. Thus, it is possible, in a method for introducing a mutation into target DNA on a plant cell genome by homologous recombination, to select, in a stable manner and as an indicator of expression of the marker gene, plant cells into which this mutation has been introduced, and it is possible to remove unnecessary sequences such as marker genes and to introduce only the necessary mutation into the target DNA in the selected cells.Linvention concerne une cellule de plante. Plus précisément, un gène marqueur qui est introduit à lintérieur dun ADN génomique par recombinaison homologue, et aux deux terminaisons duquel est ajoutée une région de reconnaissance de nucléase, peut être retiré à laide dune nucléase correspondante, et en outre, peut être retiré sans laisser de trace dans la région de reconnaissance par coïncidence dune séquence dau moins 30 nucléotides adjacente à la région de reconnaissance de nucléase. De plus, linvention concerne un procédé dintroduction de mutation dans un ADN cible au niveau du génome dune cellule de plante par recombinaison homologue, selon lequel la sélection de la cellule de plante dans laquelle une mutation est introduite, peut être effectuée de manière stable avec lexpression du gène marqueur pour indicateur. Puis, les séquences inutiles telles que celle du gène marqueur, ou similaire, sont retirées de la cellule sélectionnée, et il est possible dintroduire les mutations nécessaires dans lADN cible.植物細胞において、相同組換えによりゲノムDNA内に挿入され、その両末端にヌクレアーゼ認識部位が付加されているマーカー遺伝子を、対応するヌクレアーゼにより除去することができ、さらにヌクレアーゼ認識部位に隣接する少なくとも30ヌクレオチドの配列を一致させることにより、該認識部位も痕跡残すことなく除去できることを見出した。そして、相
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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