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SV40大T基因诱导构建先天性心脏病房间隔缺损细胞模型及其细胞库
- 专利权人:
- 翁炳焕
- 发明人:
- 翁炳焕,黄荷凤,李晓,杨红卫,吕时铭,沈敏
- 申请号：
- CN201310404082.1
- 公开号：
- CN104419671A
- 申请日:
- 2013.09.01
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及用于医学研究领域的SV40大T基因诱导先天性心脏病房间隔缺损细胞模型及其细胞库的构建，其主要特征是按常规以T4DNA连接酶、BamHI、pcDNA3.1(-)DNA及SV40LTag DNA构建SV40LTag-pcDNA3.1(-)重组子、以感受态大肠杆菌纯化重组子、以脂质体转染法将其导入经胶原酶II消化的离体传代或呈对数生长的先天性心脏病房间隔缺损细胞，使重组子与细胞的DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子的细胞克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞DNA中SV40大T基因检测、mRNA表达产物测定及DNA序列测定结果符合永生化细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为SV40LT诱导先天性心脏病房间隔缺损体外研究细胞模型冻存于液氮中，为在体外从细胞水平长期研究其发病机制奠定基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
