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导入SV40T基因构建神经管缺陷细胞模型及其细胞库
- 专利权人:
- 翁炳焕
- 发明人:
- 翁炳焕,黄荷凤,徐晨明,李晓,张雪琴,陈雁
- 申请号：
- CN201310403946.8
- 公开号：
- CN104419667A
- 申请日:
- 2013.09.01
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及用于医学研究领域的导入SV40T基因构建神经管缺陷细胞模型及其细胞库，其主要特征是按常规以T4DNA连接酶、BamHI、pcDNA3.1(-)DNA及SV40LTag DNA构建SV40LTag-pcDNA3.1(-)重组子、以感受态大肠杆菌纯化重组子、以脂质体转染法将其导入经胶原酶II消化的离体传代或呈对数生长的神经管缺陷组织细胞，使重组子与细胞的DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子的细胞克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、软琼脂集落生长、裸鼠致瘤试验、转染细胞DNA中SV40大T基因检测、mRNA表达产物测定及DNA序列测定结果符合永生化细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为SV40T基因介导神经管缺陷体外研究细胞模型冻存于液氮中，为在体外从细胞水平长期研究其发病机制奠定基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
