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一种重组艾塞那肽的生产工艺
- 专利权人:
- 东莞市麦亘生物科技有限公司
- 发明人:
- 张严冬,李相鲁,孟建军
- 申请号：
- CN201210094557.7
- 公开号：
- CN102618552B
- 申请日:
- 2012.04.01
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 张绍琳`孙诗雨
- 摘要：
- 一种重组艾塞那肽的生产工艺，通过对pET-31b（+）进行了改造，将pET-31b（+）中的KSI融合蛋白序列完全删除，同时删除蛋氨酸裂解位点（ALWN切割位点）和C末端（多肽羧基端的）组氨酸标记（His6-tag）以及终止子,在删除的位置，取代以蛋氨酸+His6-tag+GB1突变序列+肠激酶裂解序列，然后构建工程菌pET-31(b+)-Exendin-4/BL21(DE3)plays。利用了pET-31b(+)本身的可以大规模，高产量的生产多肽的优点，保留了它的功能强大的启动子，克服了目前其他生产工艺中该蛋白产物容易形成包涵体的缺点，利用了肠激酶的切割特性在目的蛋白的N末端进行切割，切割后的蛋白质完全是具有天然序列的Exendin-4。经过工程菌的发酵表达和目的蛋白的纯化后得到重组艾塞那肽。产量可以达到500mg/升以上，比目前最先进的工艺产量提高了20倍，且均为可溶性蛋白。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
