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一种利用毕赤酵母生产皮蝇素C的方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院上海兽医研究所
- 发明人:
- 何国声,高兴春,徐梅倩,郭敏,曹杰,朱顺海,赵其平,黄燕,庞程,李家诚
- 申请号：
- CN200710039980.6
- 公开号：
- CN101294184A
- 申请日:
- 2007.04.25
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2008
- 代理人:
- 严新德
- 摘要：
- 本发明公开一种利用毕赤酵母生产皮蝇素C的方法，包括如下步骤：首先用PCR扩增HC基因，酶切重组载体和片段HC，用连接酶连接后形成含有HC的重组质粒，将重组产物转入大肠杆菌，然后将含有HC的重组质粒酶切，线性化后通过电击转化入制备好的酵母感受态细胞中进行培养，筛选出多拷贝质粒菌株，对筛选出的细胞进行培养，离心收集细胞，进行诱导表达，最后将收集的上清液浓缩后，于缓冲液中透析、过滤，用阴离子交换层析柱纯化透析蛋白，收集含目的蛋白的洗脱液。本发明是一种低廉且产量高的表达HC的方法，毕赤酵母具有原核表达系统快速、简单、低廉的优点，其最大的优点是它自身分泌的蛋白很少，有利于纯化。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
