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一种利用毕赤酵母生产皮蝇素C的方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院上海兽医研究所
- 发明人:
- 何国声,高兴春,徐梅倩,郭敏,曹杰,朱顺海,赵其平,黄燕,庞程,李家诚
- 申请号:
- CN200710039980.6
- 公开号:
- CN101294184A
- 申请日:
- 2007.04.25
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2008
- 代理人:
- 严新德
- 摘要:
- 本发明公开一种利用毕赤酵母生产皮蝇素C的方法,包括如下步骤:首先用PCR扩增HC基因,酶切重组载体和片段HC,用连接酶连接后形成含有HC的重组质粒,将重组产物转入大肠杆菌,然后将含有HC的重组质粒酶切,线性化后通过电击转化入制备好的酵母感受态细胞中进行培养,筛选出多拷贝质粒菌株,对筛选出的细胞进行培养,离心收集细胞,进行诱导表达,最后将收集的上清液浓缩后,于缓冲液中透析、过滤,用阴离子交换层析柱纯化透析蛋白,收集含目的蛋白的洗脱液。本发明是一种低廉且产量高的表达HC的方法,毕赤酵母具有原核表达系统快速、简单、低廉的优点,其最大的优点是它自身分泌的蛋白很少,有利于纯化。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/